Отмывание (деглицеринизация) эритроцитов

В этой статье мы разберем методы отмывания (деглицеринизация) эритроцитов от ограждающих растворов (глицерина), которые используются перед переливанием размороженной эритроцитарной массы.

Общей важной и сложной проблемой для всех видов замораживания (медленное и ультрабыстрое) с применением интрацеллюлярных ограждающих веществ остается необходимость их удаления (отмывание) из клеток перед переливанием крови больному.

В поисках метода, который позволил бы быстро освобождать эритроциты от глицерина без их повреждения, пройден большой путь, начиная от методов диализа, многократного разведения с центрифугированием на современном оборудовании для центрифугирования крови (в 5-8 раз при больших концентрациях глицерина) и кончая современными автоматизированными методами отмывания клеток.

Все методы отмывания основаны на принципе постепенного разведения размороженных смесей эритроцитов с глицерином гипертоническими растворами веществ, не проникающими в клетку — дисахаридами, многоатомными спиртами, электролитами и другими — в снижающихся концентрациях (вплоть до изотонии). В результате в эритроцитах после отмывания остается менее 0,5 % глицерина и, таким образом, гипертоническое состояние клеток ликвидируется. Однако технология удаления ограждающих растворов остается сложной. Большинство этих методов из-за громоздкости и трудоемкости обеспечения стерильности обрабатываемых размороженных эритроцитов сдерживает их широкое применение в лечебной практике.

В последние годы за рубежом (США, Япония, Венгрия и некоторые другие страны) предпочтение отдается автоматизированным методам деглицеринизации в аппаратах фракционаторах.

Удешевление и упрощение методов деглицеринизации размороженных эритроцитов является одной из наиболее важных проблем практики криоконсервирования, так как главным недостатком криоконсервированных клеток остается их большая стоимость по сравнению с кровью, консервированной при положительной температуре (метод требует дорогостоящего оборудования, большого количества растворов и т. д.).

Принципы деглицеринизации

На основе существующих методов деглицеринизации как в России, так и за рубежом, лежат три основных принципа:

1. серийное центрифугирование,
2. непрерывное центрифугирование в потоке отмывающих растворов на аппаратах-сепараторах,
3. обратимая цитоагломерация.

На основе этих трех принципов отмывания предложено большое количество различных модификаций методов. Однако поиски наиболее эффективного метода отмывания размороженных эритроцитов продолжаются.